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3D灌流培養一般的使用流程如下

更新時(shí)間:2023-07-13      點(diǎn)擊次數:975
  3D灌流培養是一種細胞培養技術(shù),其主要作用是在三維環(huán)境中模擬體內組織和器官的生理條件,以提高細胞生長(cháng)、分化和功能表達。通過(guò)提供細胞所需的氧氣、營(yíng)養物質(zhì)和廢棄物的排出,模擬體內的血液循環(huán)環(huán)境。其主要特點(diǎn)包括:
  1.三維支架:提供細胞附著(zhù)和生長(cháng)的支撐結構,通常由生物可降解的材料制成。
  2.灌流系統:通過(guò)灌注培養液,維持三維結構內的流動(dòng),以促進(jìn)營(yíng)養物質(zhì)的輸送和廢棄物的清除。
  3.細胞分布均勻性:灌流培養系統可以確保細胞在整個(gè)三維結構中均勻分布,從而模擬更真實(shí)的組織環(huán)境。
  4.力學(xué)刺激:通過(guò)調節灌注速度和流體剪切力等參數,可以模擬體內組織受到的力學(xué)刺激,如血流和機械壓力。
  5.長(cháng)期培養:與傳統的二維培養相比,灌流培養提供更穩定、更持久的細胞培養環(huán)境,適用于長(cháng)時(shí)間的實(shí)驗和觀(guān)察。
  3D灌流培養一般的使用流程:
  培養基準備:根據實(shí)驗要求,準備適當的培養基,包括營(yíng)養物質(zhì)、生長(cháng)因子等。確保培養基的配制正確,并進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾以確保無(wú)菌狀態(tài)。
  細胞或組織準備:根據研究目的,選擇需要培養的細胞或組織,并進(jìn)行必要的處理,如細胞分離、組織切割等。確保細胞或組織的純度和活性。
  3D培養裝置準備:準備好灌流培養所需的培養器具,如培養箱、培養皿、生物反應器等。確保裝置的清潔和無(wú)菌狀態(tài)。
  構建3D培養結構:根據實(shí)驗設計,將細胞或組織放置在3D培養裝置中,如培養皿、生物反應器等。可以使用支架、基質(zhì)或其他輔助材料來(lái)構建和支撐3D培養結構。
  灌流培養操作:將預先準備好的培養基加入到3D培養裝置中,確保培養結構被培養基覆蓋。使用灌流裝置,通過(guò)調節流速和壓力,實(shí)現培養基在3D培養結構中的流動(dòng)。根據實(shí)驗要求,可以調整灌流速度、時(shí)間和壓力等參數。
  培養條件控制:將3D培養裝置放置在合適的培養箱或生物反應器中,維持適宜的培養條件,包括溫度、濕度和二氧化碳濃度等。根據實(shí)驗要求,可以對培養條件進(jìn)行調節。
  培養觀(guān)察和維護:定期觀(guān)察和評估3D培養結構的生長(cháng)和發(fā)育情況。根據需要,可以進(jìn)行培養基的更換、細胞或組織的采樣、細胞增殖或分化的調控等操作。
  實(shí)驗結束和分析:根據實(shí)驗設計,確定實(shí)驗結束的時(shí)間點(diǎn),并進(jìn)行樣本采集和分析。可以使用各種細胞和組織學(xué)技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)等進(jìn)行結果評估和數據分析。
 

3D灌流培養

 

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